Sắc ký màng anion mạnh Q

 

2. Ưu điểm của sản phẩm

2.1 Nhanh chóng và hiệu quả - đạt được khả năng liên kết cao với tốc độ dòng chảy nhanh hơn tới 40 lần so với nhựa truyền thống. So với sắc ký tầng đóng gói, thời gian xử lý bằng sắc ký màng giảm 30–40 lần. Tốc độ dòng vận hành điển hình là 10 MV/phút.

2.2 Sắc ký màng hiệu quả liên kết cao - thể hiện khả năng tải cao và tốc độ dòng chảy cao trong điều kiện giảm áp suất thấp, cho phép thu giữ các phân tử sinh học tích điện trong một lần đi qua.

2.3 Có thể mở rộng và linh hoạt - toàn bộ loạt sản phẩm sắc ký màng có thể đáp ứng nhu cầu đa dạng về tinh chế đại phân tử sinh học, bao gồm tất cả các giai đoạn từ phát triển quy trình đến sản xuất-quy mô lớn. Thiết kế cấu trúc kiểu viên nang hỗ trợ cả hoạt động sử dụng một lần và tái sử dụng sau khi làm sạch.

2.4 Cải thiện năng suất - Thiết kế nhỏ gọn giúp giảm thiểu diện tích cơ sở. Bằng cách loại bỏ các hoạt động đóng gói, làm sạch, xác nhận làm sạch và lưu trữ cột, quy trình này cần ít bộ đệm hơn để cân bằng và có thể được thực hiện trực tiếp mà không cần chuẩn bị cột. Chi phí lao động có thể giảm tới 50%.

 

3. Thông số kỹ thuật

3.1 Vật liệu kết cấu

	quy mô phòng thí nghiệm	quy mô nhỏ	quy mô thí điểm	quy mô sản xuất
thể tích màng	0,2ml	5ml	140ml	5L
Cấu trúc hỗ trợ màng:	polypropylen (PP)
vỏ màng	polypropylen (PP)
Chiếc nhẫn	silicon

 

3.2 Đặc tính vận hành

	quy mô phòng thí nghiệm	quy mô nhỏ	quy mô thí điểm	quy mô sản xuất
thể tích màng	0,2ml	5ml	400ml	5L
Tốc độ dòng chảy khuyến nghị	1-6ml/phút	25-150ml/phút	2-12L/phút	25-150L/phút
Nhiệt độ hoạt động tối đa	35 độ
Áp suất vận hành tối đa	3bar (25 độ)
Chênh lệch áp suất tối đa	3bar (25 độ)
Điều kiện bảo quản:	Dung dịch nước etanol 20%

 

Tuổi thọ của sắc ký màng Q tương đương với sắc ký gel agarose.

 

 

Hình 1. Những thay đổi về khả năng tải sắc ký màng sau nhiều lần sử dụng được BSA giám sát

Ngoài ra, chúng tôi đã đánh giá hiệu quả loại bỏ của sắc ký màng đối với protein và axit nucleic của tế bào chủ. Kết quả như sau.

	ADN				HCP
	Phục hồi IgG	Hàm lượng (pg/mg IgG) bằng RT PCR		Yếu tố loại bỏ	Nội dung (ng/mg của IgG)bởi Elisa		Yếu tố loại bỏ
Chạy	%	Trước màng Q	Sau màng Q	Nhật ký	Trước màng Q	Sau màng Q	Nhật ký
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Bảng 1. Tỷ lệ loại bỏ DNA và protein tế bào chủ trong vật liệu IgG biểu hiện CHO{1}}bằng phương pháp sắc ký màng Q

 

Một loạt thí nghiệm đã chứng minh rằng sắc ký màng Q có thể loại bỏ tạp chất một cách hiệu quả trong khi vẫn duy trì khả năng phục hồi IgG mục tiêu cao.

Ngoài ra, chúng tôi đã so sánh sắc ký màng Gudiling với các nhãn hiệu nhập khẩu và dữ liệu về khả năng chịu tải như sau:

Khả năng tải (mg/ml)	Sartorius	PALL	hướng dẫn
BSA	29	60	45
SOD	25	40	35
Protein A	27	45	40
Trypsin	30	56	44

Bảng 2. Hiệu suất tải của các loại protein khác nhau trên sản phẩm của chúng tôi và sản phẩm của đối thủ cạnh tranh

Đánh giá tổng thể cho thấy khả năng tải của chúng tôi tương đương với sản phẩm nhập khẩu,

Hình 2.Sử dụng mô-đun sắc ký màng Q, BSA được sử dụng làm protein tiêu chuẩn để đánh giá khả năng liên kết. Khả năng liên kết động được so sánh với sản phẩm nhập khẩu. Kết quả cho thấy hầu hết protein mục tiêu có thể được thu giữ và rửa giải bằng150 mM NaClkhi sử dụng BSA làm protein mẫu.

Thông qua các điều kiện rửa giải khác nhau, chúng tôi thấy rằng hoạt động rửa giải của sắc ký màng tương tự như sắc ký gel agarose. Độ tinh khiết của protein rửa giải ở các nồng độ muối khác nhau thay đổi đáng kể. Trong quá trình phát triển và sản xuất thực tế, cần xác định định lượng các điều kiện rửa giải tối ưu để thu được protein mục tiêu có độ tinh khiết cao.

 

4．Trường hợp ứng dụng điển hình

Loại bỏ DNA, virus, protein tế bào chủ (HCP) và nội độc tố

Thu giữ các plasmid, virus và protein cũng như tinh chế oligonucleotide

 

5. Quy trình vận hành

5.1: Chuẩn bị và lắp ráp thiết bị:

5.1.1:Hệ thống sắc ký AKTA: Lắp đặt module sắc ký màng theo cách tương tự như cột nhồi. Đảm bảo rằng hướng mũi tên trên mô-đun nhất quán với hướng dòng cấp liệu. Kết nối hệ thống bằng đầu nối Luer hoặc phụ kiện Tri-Kẹp.

5.1.2 Đặt tốc độ dòng vào ở mức 5–10 MV/phút và sử dụng bộ đệm cân bằng để loại bỏ không khí khỏi hệ thống. Sau khi đảm bảo không có bọt khí ở dòng ra, nối đầu ra thấm vào hệ thống sắc ký.

5.2:Xử lý trước{1}}sử dụng:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV để đảm bảo màng đạt trạng thái cân bằng.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV để đảm bảo màng đạt trạng thái cân bằng.

5.3 Quy trình sắc ký

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV cho đến khi màng đạt trạng thái cân bằng.

5.3.2 Sau khi mẫu được lọc trước qua bộ lọc 0,22 μm, hãy nạp mẫu lên cột cho đến khi toàn bộ mẫu được đưa vào hoặc đạt đến khả năng liên kết sắc ký.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV cho đến khi tín hiệu UV giảm xuống mức cơ bản.

5.3.4 Thực hiện rửa giải gradient hoặc tuyến tính theo quy trình đã thiết kế và thu thập các phân đoạn nếu cần.

5.4 Xử lý sau sử dụng CIP – Thiết bị sắc ký màng CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV cho đến khi tín hiệu UV giảm xuống dưới mức cơ bản.

5.4.2 Sau khi tuần hoàn 30 phút, chuyển sang rửa bằng nước cho đến khi pH đạt 7–8, sau đó chuyển sang etanol 20% và tiếp tục rửa cho đến khi độ dẫn điện ổn định.

5.5, Lưu trữ sắc ký màng:

Sau khi sử dụng và hoàn thành CIP, mô-đun màng có thể được tháo rời và bảo quản trong etanol 20% hoặc giữ trực tuyến ở nhiệt độ phòng trong etanol 20%. Dung dịch ethanol phải được thay thế và kiểm tra định kỳ.

 

6. Thông tin đặt hàng

Q Anion mạnh-Bộ lọc sắc ký màng trao đổi

	quy mô phòng thí nghiệm	quy mô nhỏ	quy mô thí điểm	quy mô sản xuất
Mẫu sản phẩm	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
thể tích màng	0,2ml	5ml	400ml	5L

Chú phổ biến: q sắc ký màng anion mạnh, Trung Quốc, nhà cung cấp, nhà sản xuất, nhà máy, bán buôn, số lượng lớn, có hàng, mẫu miễn phí