Giải đáp các câu hỏi chuyên môn về ống ly tâm siêu lọc

1. Vật liệu màng của ống siêu lọc là gì?

Màng polyethersulfone có khả năng chặn trọng lượng phân tử rõ ràng và chính xác, tính chất vật lý và hóa học ổn định, hấp phụ protein cực kỳ thấp và thu hồi sản phẩm cao

2. Nếu các protein có trọng lượng phân tử khác nhau cần được tách ra, trọng lượng phân tử của protein cần bao nhiêu sự khác biệt?

Hai protein cần phải có kích thước khác nhau gấp 10 lần hoặc nhiều hơn.

3. Ống ly tâm siêu lọc có thể được sử dụng để tập trung virus không?

Ống ly tâm siêu lọc có thể tập trung virus nhiều lần hoặc thậm chí là thời gian cao. Chúng tôi có một màng đặc biệt cho virus. Các loại virus khác nhau cần chọn kích thước lỗ chân lông màng thích hợp

4. Ống ly tâm siêu lọc có thể được khử trùng và chống kiềm không?

Nó có thể được khử trùng bằng dung dịch nước ethanol 75%. Vật liệu của chúng tôi có thể chịu được 0,1-0,5n natri hydroxit kiềm rửa

5. Ống ly tâm siêu lọc có thể được sử dụng để khử trùng áp suất cao

Chúng tôi có một ống ly tâm siêu lọc đặc biệt phù hợp để khử trùng áp suất cao

6. Xem xét sự ổn định của protein, ống siêu lọc có thể được ly tâm ở nhiệt độ thấp không?

Có, vật liệu của chúng tôi có khả năng chịu được nhiệt độ thấp, nhưng thời gian tập trung sẽ lâu hơn. Tốc độ lọc của màng có liên quan đến nhiệt độ chất lỏng thức ăn

7. Về tỷ lệ phục hồi

Nói chung, tỷ lệ phục hồi của chất tan với nồng độ lớn hơn 0,1mg / ml là 90% trở lên. Nói chung, việc mất mẫu là do hấp phụ không đặc hiệu trên bề mặt của màng lọc và bề mặt của ống vật liệu. Để có được tỷ lệ phục hồi cao, trọng lượng phân tử được giữ lại của màng lọc được chọn là khoảng 1/3 protein mục tiêu, màng siêu lọc là màng bất đối xứng, kích thước lỗ chân lông của nó thường được phân phối và nó có thể rò rỉ dưới áp suất cao ly tâm. Trong điều kiện này, chất lỏng protein có thể bị biến dạng, do đó, khẩu độ đánh chặn càng nhỏ, tốc độ dòng chảy càng chậm, nhưng tốc độ phục hồi sẽ cao hơn.

8. Khi protein được tập trung, có mưa. Làm thế nào để đối phó với nó?

Nếu protein được tập trung quá nhanh hoặc quá nhiều, nó có thể gây ra sự kết tủa protein. Nồng độ cuối cùng sau khi nồng độ protein không nên quá cao; Đối với các protein nhạy cảm với tốc độ tập trung và dễ kết tủa, các phương pháp cải tiến được đề xuất như sau:

1) Giảm tốc độ ly tâm,

2) Sử dụng màng siêu lọc với trọng lượng phân tử lớn hơn

3) Thổi và hút ống nồng độ và sau đó ly tâm

9. Những lý do có thể tại sao ống ly tâm siêu lọc không thể được ly tâm xuống?

Nếu ống siêu lọc không thể được ly tâm, việc ly tâm ban đầu có thể được thực hiện với dung dịch nước ethanol khoảng 20%, bởi vì sau khi màng siêu lọc được sấy khô hoàn toàn, bề mặt màng yếu kỵ nước và thông lượng có thể được phục hồi sau khi ngâm với dung môi căng bề mặt thấp.

10. Sử dụng và bảo quản ống siêu lọc đúng cách

Ống siêu lọc ban đầu phải được ly tâm bằng nước tinh khiết trước khi sử dụng để xác minh tính toàn vẹn của nó. Sau mỗi lần sử dụng, cần phải lưu trữ nó ở trạng thái ẩm ướt để ngăn màng khô.

11. Làm thế nào để loại bỏ nội độc tố từ ống siêu lọc?

Ống siêu lọc do chúng tôi cung cấp chưa được điều trị bằng nội độc tố. Đồng thời, do sự tồn tại rộng rãi của nội độc tố trong tự nhiên, các mẫu cần độc tố bên trong có thể được làm sạch trước bằng natri hydroxit 0,5N trước khi thí nghiệm, và sau đó làm sạch bằng nước RO để loại bỏ hầu hết nội độc tố tố.

12. Khi protein cô đặc được phân tích ở hạ lưu, người ta thấy rằng có sự can thiệp. Lý do là gì?

Ống siêu lọc có thể được làm sạch trước bằng bộ đệm hoặc nước tinh khiết. Nếu sự can thiệp vẫn còn tồn tại, hãy làm sạch nó bằng natri hydroxit 0,1N, và sau đó làm sạch nó bằng nước tinh khiết.

13. Có thể có sự hấp phụ không đặc hiệu giữa protein mục tiêu và màng siêu lọc trong quá trình tập trung. Làm thế nào để cải thiện nó?

Chúng tôi sử dụng màng polyethersulfone ưa nước, nhưng đối với một số protein có đặc tính đặc biệt, sự hấp phụ không đặc hiệu của chúng với màng có thể được tăng cường. Trong trường hợp này, chúng tôi có thể cố gắng xử lý trước ống siêu lọc trước khi thử nghiệm hoặc liên hệ với kỹ sư của chúng tôi.

14. Sau khi tập trung, người ta thấy rằng không có protein mục tiêu trong cô đặc. Những lý do có thể là gì?

1) Nồng độ ban đầu của protein không nên quá thấp. Nếu nồng độ quá thấp, màng có thể không được giữ lại

2) Chọn kích thước lỗ chân lông màng thích hợp. Ly tâm và nồng độ ống siêu lọc thuộc về lọc chết. Kích thước lỗ chân lông màng thường nhỏ hơn 2 lần hoặc nhiều hơn protein mục tiêu

3) Chọn tốc độ ly tâm thích hợp

4) Liệu protein mục tiêu có kết tủa hay không